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两种“叶绿体中色素的提取和分离”实验方法的比较

实验的成功与否,主要与实验的方法有关,同时与实验过程中的操作步骤也有很大的关系,在"叶绿体中色素的提取和分离"实验中,把高中教材中与大学教材中的实验方法做一个比较,目的是得出那一种实验方法较好.

21 0 0年第 8期 3 5期总 6

两种 绿体中色素的提取和分离”验方法的比较 叶实 罗丽萍 (州省铜仁一中贵州铜仁 5 4 0 )贵 5 3 0中图分类号: 6 G 3文献标识码: A文章编号: 0 7 0 4 ( 0 0 0— 2 7 0 1 0— 7 5 2 1 )8 0 3— 1

到色素提取液 .两者所用的有机溶剂不同 .法一使用的是丙但方

酮。法二使用的乙醇。由于丙酮对人体具有一定的毒性,以方方所法二中用乙醇代替丙酮 .这样降低了实验药品对人体伤害的风 险;叶绿体色素的分离实验中,者之间的方法差异很大,异在两差主要有以下几个方面: )法一使用的是一张滤纸条 .方法二 1方而

在“绿体中色素提取和分离”验中 .中生物教材所描述叶实高 的实验方法与大学植物实验指导教材中所描述的不同 .别是在特

使用的是一张完整的圆形滤纸: )法一使用毛细吸管吸取少量 2方滤液,出一条细而直的滤液细线,方法二是取一张滤纸条,画而用滴管吸取叶绿体色素提取液沿纸条的长度方向涂在纸条的一端: 3方法一是将滤纸条 (滤液细线的一端朝下 )微斜靠着烧杯 )有略的内壁 .轻地插入到层析液中 .方法二是将带有色素纸捻的轻而 一

叶绿体色素的分离中,异很大。笔者在做该实验时分别采用上差 述两种方法 .虽然两种方法最终都能观察到不同颜色的色素带 .

但是效果不同。下面就这两种方法做一比较 .目的是看那一种其 方法效果较好 1两种实验方法的比较 高中数材中的实验方法步骤 (方法一)大 学实验教材中的实验方法步骤 (方法- ) - ()叶绿色中色素的提取 1 ()叶绿色中色素的提取 1 a称取 5 _克绿色叶片,剪碎后放入研钵 a取绿色叶片 4片 ( 2,去 .~5约克)中. 掉中脉并剪碎,放入研钵中。 b向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸 b . .向研钵中放入少许二氧化硅和碳钙,再加 5丙酮,进】 I I L行迅速、充分的酸钙, 2 m%乙醇,加~3L 5的 9研磨至研磨。 糊状,再加 l ̄1m 9% O 5 乙醇, l5提取 3 5i ~ m n。

端插入圆形

滤纸的小孔中 .把带有纸捻的圆形滤纸平放盖在再

烧杯上,纸捻下端浸入层析液中。由于两种实验方法不同 .使所得的实验结果差异较大 .上表中得出 .用方法二得到的实验结从采果明显好于方法一。所以在叶绿体色素的提取和分离实验中 .方 法二比方法一好

2造成实验结果差异的原因、

叶绿体色素的提取和分离实验中 .使用不同的实验方法。虽然都能得到相应的实验效果 .是所得的实验效果在理想程度上但存在较大的差异 .成方法一的实验效果不理想 .法二的效果造方 较理想的原因可能与以下几个方面有关

c将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进 c将上清液过滤于三角瓶中, . .残渣用行过滤.将滤液收集到一试管中,及时 l L 5乙醇冲洗,一 O% m9同过滤于三角 用棉塞将试管口塞紧. 瓶中. ( )叶绿体色素的分离 2 ( )叶绿体色素的分离 2 a取一张干燥的定性滤纸, .剪成长 6 a取圆形定性滤纸一张, c .在中心戳一宽 ii c的滤纸条,将滤纸条的一端剪去圆形小 (约 3m。 L直径 m )另取一张滤 两并在距这一端 1角, c m处用铅笔画一纸条,用滴管吸取乙醇叶绿蝽色素提

方法一实验效果不理想的原因:)用毛细吸管划出的滤液 1细线,条粗细不均,响层析效果; )画的滤液线中,素的线影 2所色含量较少 .析后效果不明显。层 方法二实验效果较理想的原因: )划滤液线 .滴管吸取 1不用

取液沿纸条的长度方向涂在纸条的 端,色素扩敌的宽度限制在 05m .c以内,风干后,重复操作几次,然后沿长度方向卷成纸捻,使浸过叶绿摊色素溶液的一侧恰在纸捻的一端 b用毛细吸管吸取少量滤液, .沿铅笔线 . b将纸捻带有色素的一端插入圆形均匀地画出一条细而直的滤液细线.滤纸的小 L使其与滤纸刚刚平齐待 中,滤液干后,再画二三汝. (匆凸出)。 一

条细的横线.

叶绿体色素提取液涂在滤纸条的一端 .样使得滤纸条上色素含这 量较多; )分离的色素展现在一张较大的圆形滤纸上,样便 2使这 于观察。

通过对两种实验方法步骤及实验结果的比较 .出了方法二得

好于方

法一。虽然方法二好于方法一。是对于高中生物教师来但 说 .指导学生做该实验时 .是要采用高中生物课本所描述的在还方法 (法一 )因为该内容属于考试的范围。但可以用方法二作方,为实验的一个补充,为效果较好,素带的颜色及条数清晰,因色有利于学生对相关知识的理解。

c 3L .】层析液倒人烧杯中,将 I l将滤纸条 . l L c将 O层析到如烧杯中 l,把带 (有滤液细线的一端朝下)略微斜靠着有纸捻的圆形滤l平放盖在烧杯上,氏 烧杯的内壁,轻轻地插入到层析液中,使纸捻下端浸入层析液中. 随后用培养皿盖盖上烧杯,匆让滤纸上 的滤液细线触到层析液.

d .当层斩敞接近搏玳条一霄时,取 .析液接近滤纸边缘时,哥 d当层取出滤出滤纸条,风干,观察色素带的条数及纸,风干。观察观察色素带的条数及颓色. 颜色. ()实验结果 3 ()实验结果 3色素带较窄,颜色不清晰。 色素帝较宽,颚色明显.

参考文献:

【 A L育出版社生物自然室 .物(一册 )】 1 ̄]生第[ . M北京:民教育出人 版社. 0 . 2 0 0

【张立军、金娟 .物生理学实验教程[ .京:国农业大学 2】樊植 M】北中在叶绿体色素的提取实验中,表中可以看出 .然都能得出版社 .0 7从虽 20 .

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